La personne recrutée aura pour principale mission l’expression en systèmes recombinants ainsi que la purification de GPCRs et de protéines associées. Cela implique la mise en place de système de détection et de purification des complexes de signalisation et leur caractérisation fonctionnelle. La personne recrutée participera à la purification de vésicules extracellulaires et à la caractérisation structurale de complexe de signalisation sur des échantillons issus de cultures primaires de neurones en utilisant des approches de microscopie électronique en conditions cryogéniques (cryoEM, cryoET et cryoFIB).
Activités principales :
Préparation et purification des protéines complexes :
• Mettre en œuvre des protocoles de purification des protéines complexes
• Procéder à la caractérisation biochimique des protéines et des complexes protéiques
• Mettre en œuvre des techniques de spectrométrie de masse, de cristallographie des rayons X et de résonance magnétique nucléaire
• Optimiser les conditions expérimentales pour maintenir la stabilité et l’activité des protéines
Etudes de la signalisation cellulaire :
• Réaliser des analyses biochimiques des voies de signalisation intracellulaire en
lien avec les protéines complexes (Western Blot, ELISA, immunoprécipitation)
• Investiguer les interactions entre les protéines de signalisation et les autres biomolécules dans des modèles cellulaires
• Mettre en place des modèles expérimentaux visant à étudier l’impact des modifications post traductionnelles sur les fonctions de signalisation
Développement de nouvelles approches expérimentales :
• Développer de nouvelles méthodologies pour la capture et l’analyse des
complexes protéiques
• Optimiser les protocoles expérimentaux afin d’améliorer la sensibilité et la
spécificité des analyses
Analyse et traitement des données expérimentales :
• Procéder à l’analyse des résultats obtenus à partir des expériences biochimiques et de biophysique et traiter les données via des logiciels spécialisés
• Rédiger des rapports d’analyse et de publications scientifiques en collaboration
avec l’équipe de recherche
• Participer aux réunions d’équipe pour discuter des résultats expérimentaux et des avancées du projet
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