La personne recrutée développera une stratégie pour introduire des marqueurs fluorescents dans des compartiments cellulaires, afin d'identifier et imager des complexes protéiques d'intérêt à l'aide de la microscopie à fluorescence, de déterminer leur colocalisation avec d'autres protéines d'intérêt, en haute résolution. La personne recrutée planifiera et exécutera ses expériences de manière indépendante, en étroite collaboration avec la personne responsable du projet. Elle participera également activement à la gestion du laboratoire.
Activités
- Apport d'une expertise en microscopie à fluorescence dans l'équipe d'accueil
- Génération et transfection d'ADN plasmidique avec des constructions porteuses de marqueurs fluorescents
- Développement de méthodes sur les microscopes à fluorescence (confocal et super résolution), acquisition d'images, et traitement des données
- Isolation de compartiments cellulaires d'intérêt (immunoprécipitation), marquage fluorescent, et imagerie
- Génération de nouvelles lignées stables de cellules mammifère
- Participation à la rédaction d'articles scientifiques
- Recherche littéraire pour identifier les techniques de fluorescence de pointe pouvant faire progresser le projet
- Gestion des commandes et des stocks du laboratoire
Compétences
- Connaissances approfondies en biologie cellulaire : culture de cellules mammifères, transfection, immunoprécipitation, western blot.
- Maîtrise de la microscopie à fluorescence : préparation de lamelles, utilisation d'anticorps à marqueurs fluorescents, manipulation du microscope, traitement d'image avec ImageJ
- Expérience dans la purification de protéines serait un plus (expression bactérienne et mammifère
- Compétences d'organisation et de planification, gestion de plusieurs projets en parallèle
- Capacité à travailler en autonomie et en équipe, facilité à collaborer
- Anglais et français niveau B2 minimum
Contexte de travail
La personne recrutée intègrera l'équipe Wild au sein du groupe SAGAG qui travaille à la compréhension des mécanismes moléculaires des enzymes impliquées dans la biosynthèse de l'héparane sulfate. Les sulfates d'héparane sont de longues chaînes de polysaccharides très complexes trouvées à la surface des cellules et leur biosynthèse implique plus d'une douzaine d'enzymes membranaires localisées dans l'appareil de Golgi. Notre équipe combine des analyses biochimiques in vitro avec des approches de biologie structurale, en particulier la cryo-EM monoparticule, pour étudier les mécanismes moléculaires des enzymes de biosynthèse de l'héparane sulfate et leur assemblage en complexes macromoléculaires.
Situé sur le Polygone scientifique de Grenoble (ESRF/ILL/EMBL/IBS), l'Institut de Biologie Structurale (IBS) est un acteur d'envergure nationale et internationale dans le domaine de la biologie structurale intégrée. A la fois centre de recherche, plateau technique, site d'accueil et de formation scientifique, l'IBS a pour vocation le développement de recherches en biologie structurale, un champ de recherche capital pour la compréhension des mécanismes biologiques fondamentaux. Il s'appuie sur 12 plateformes à la pointe de la technologie.
En tant qu'unité mixte de recherche (CEA-CNRS-UGA) l'IBS est composé de 20 groupes de recherche, chacun de ces groupes proposant une approche multi-disciplinaire, aux frontières de la biologie, de la physique et de la chimie, en cohérence avec 3 axes de recherche. Près de 300 personnes y travaillent chercheurs, doctorants, ingénieurs et techniciens dans un environnement multiculturel et international.
La personne recrutée intègrera l'équipe Wild au sein du groupe SAGAG qui travaille à la compréhension des mécanismes moléculaires des enzymes impliquées dans la biosynthèse de l'héparane sulfate. Les sulfates d'héparane sont de longues chaînes de polysaccharides très complexes trouvées à la surface des cellules et leur biosynthèse implique plus d'une douzaine d'enzymes membranaires localisées dans l'appareil de Golgi. Notre équipe combine des analyses biochimiques in vitro avec des approches de biologie structurale, en particulier la cryo-EM monoparticule, pour étudier les mécanismes moléculaires des enzymes de biosynthèse de l'héparane sulfate et leur assemblage en complexes macromoléculaires.
Contraintes et risques
Cultures de cellules dans un laboratoire de bio-sécurité de niveau 2
L'activité se fera indifféremment en français ou anglais, néanmoins il est attendu que le candidat non-francophone s'efforce d'apprendre les bases du français afin de faciliter la communication et son intégration dans le laboratoire.
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