Assistant·e ingénieur·e en expérimentation et instrumentation biologiques h/f

Mission principale L'assistant-e ingénieur-e sera rattaché(e) pour ses activités de recherches à l'équipe «Immunorégulation, Chimiokines et persistance Virale ». L'assistant-e ingénieur-e assureraaussi, dans le cadre de sa mission, des fonctions d'encadrement et de formation enexpérimentation et instrumentation au sein de l'équipe et, plus largement, de manièretransversale, étendues à toute l'Unité.

Activitésprincipales :
Les activités de Recherche se déclineront selon les quatre grands axes méthodologiques quisont au coeur des projets de l'équipe :
- Réaliser des cultures cellulaires dont des cultures primaires, des cultures tridimensionnelles
- Modèles 3D de peau et des organoïdes de peau ;
- Analyser le phénotype des cellules, de leur transcriptome et protéome ;
- Réaliser des tests fonctionnels à l'échelle cellulaire et moléculaire ;
- Participer à de l'expérimentation dans des modèles murins.
De plus, il sera demandé, à terme, à l'AI :
- De participer à l'encadrement et à la formation expérimentale des stagiaires aux
techniques maîtrisées et aux règles d'hygiène et sécurité qu'elles impliquent.

Connaissances :
- Bonne connaissance des modèles de cultures et d'imprimante 3D et des connaissances sur
les techniques d'organoïdes de peau qui seront nécessaires à terme de maîtriser.
- Bonne connaissance des tests fonctionnels à l'échelle cellulaire et moléculaire utilisés dans
l'équipe et qui seront nécessaires à terme de maîtriser dont :
o Les techniques de transfert d'énergie (HTRF, DERET, BRET) mesurant les
activités et les interactions d'une protéine ;
o Les tests basés sur la détection de la luciférase visant à mesurer une activité
(force d'un promoteur.) ou des interactions entre protéines (complémentation
GPCA) ;
o Les techniques de migration cellulaires dont la chimiotaxie et le test de
migration après blessure.
- Utilisation des logiciels de visualisation (Adobe photoshop & illustrator FiJi, NDP.view2.), et
d'analyse (Excel, Prism) qui seront nécessaires à terme de maîtriser.
- Très bonne connaissance des règles d'hygiène, de sécurité et d'éthique.

Savoir-faire :
- Maîtriser les méthodes de culture, de manipulation et d'analyse des lignées cellulaire ainsi
que des cellules primaires dont :
o Les méthodes de transfection et transduction lentivirale des cellules ;
o L'analyse du phénotype des cellules par cytométrie en flux, microscopie et
immunohistochimie.
- Maîtriser les méthodes d'analyse des ARN et des protéines dont :
o L'extraction des ARN, leur dosage et leur analyse par PCR quantitative ;
o L'extraction des protéines, leur dosage et leur analyse par western blot et
immunoprécipitation.
- Maîtriser l'entretien d'une colonie de souris en vue de la réalisation d'expériences, de lamise en place d'un projet d'éthique (au minimum avoir la formation « ApplicateurRongeurs »), à la manipulation de souris (contention et prise de sang) et prélèvements suranimal post mortem.