Dans le cadre d'un projet financé par l'Agence Nationale de la Recherche, la mission du chercheur sera de produire et purifier la protéine membranaire Cdr1 des levures de type Candida responsable de l'efflux des antifongiques azolés.
Activités
- Produire dans la gamme de 3-6 L des levures de type S. cerevisiae exprimant les formes naturelles et mutées de Cdr1
- Enrichir la fraction membranaire où est localisée la protéine,
- Extraire de cette fraction la protéine à l'aide de détergent ou équivalent,
- Purifier dans la gamme du mg par chromatographie d'affinité et exclusion de taille la protéine
- Mesurer l'affinité de substrats et inhibiteurs par fluorescence extrinsèque et intrinsèque,
- Mesurer l'activité ATPasique de la protéine en présence de ces ligands,
- Reconstituer la protéine en lipides pour mesurer le transport d'antifongiques,
- Screener des candidats inhibiteurs sur des souches de type Saccharomyces et Candida
Compétences
- Maîtrise de la production de protéines membranaires dans la levure,
- Maîtrise de l'enrichissement par centrifugations différentielles de la fraction membranaire contenant la protéine,
- Maîtrise de l'utilisation de détergents pour extraire la protéine de cette fraction,
- Maîtrise des méthodes de purification par chromatographie et des appareils utilisés (Akta),
- Maîtrise des méthodes de mesurer d'affinité de ligands par fluorescence extrinsèque et intrinsèque, nanodsf, nanotemper
- Maîtrise des outils d'analyse statistique des données (Prism)
Contexte de travail
Recrutement dans le cadre d'un projet financé par l'Agence Nationale de la Recherche, dans l'équipe "Résistance aux médicaments & Protéines Membranaires" de Pierre Falson, au sein du laboratoire "Microbiologie Moléculaire et Biochimie Structurale", unité mixte de Recherche CNRS-UCBL1 n°5086, localisée à l'IBCP à Lyon.
Informations sur le laboratoire :
web : https://mmsb.cnrs.fr
Thème d'études : MMSB est une unité de recherche multidisciplinaire pilotée par le CNRS et l'Université de Lyon qui a pour vocation de comprendre, à l'échelle moléculaire et cellulaire, comment les micro-organismes pathogènes se multiplient et engendrent des maladies, et comment les pathologies développent des résistantes aux médicaments.
Personnel : environ 70 Chercheurs statutaires et autant de stagiaires.
Informations sur l'équipe :
adresse : IBCP, 7, passage du vercors, 69007 Lyon
web : https://mmsb.cnrs.fr/equipe/resistance-aux-medicaments-et-proteines-membranaires/
THème d'étude : DRMP étudie les protéines qui empêchent les médicaments cytotoxiques (anticancéreux, antifongiques, antibiotiques) d'agir en les expulsant hors des cellules ciblées. Leur action contribue à faire du cancer et des maladies infectieuses les causes principales de mortalité dans le monde. Ces protéines font partie de deux très grandes familles, les transporteurs ABC (ATP-Binding Cassette) et les facilitateurs majeurs MFS. L'équipe étudie leur mécanisme, leur fonction, détermine leur structure et développe des inhibiteurs pour bloquer leur action.
Personnel : 3 statutaires 3 étudiants en thèse
Le poste se situe dans un secteur relevant de la protection du potentiel scientifique et technique (PPST), et nécessite donc, conformément à la réglementation, que votre arrivée soit autorisée par l'autorité compétente du MESR.
Contraintes et risques
Risques liés aux expériences de type Biochimie
En cliquant sur "JE DÉPOSE MON CV", vous acceptez nos CGU et déclarez avoir pris connaissance de la politique de protection des données du site jobijoba.com.