Missions :
L’ingénieur d’étude participera à un projet de caractérisation de protéines virales essentielles à l’assemblage des poxvirus. Il aura pour mission de développer et entretenir l’expertise technique en virologie, biochimie, biologie cellulaire et moléculaire pour étudier le rôle de ces protéines dans le remodelage des membranes soit in vitro après reconstitution de protéoliposomes, soit directement in cellula dans un contexte d’infection virale ou non. Pour cela, il appliquera aussi différentes approches de microscopie à fluorescence, corrélative et électronique en 3D et en cryo en lien avec les plateformes technologiques de l’I2BC et les collaborateurs.
Activités :
Activités Principales : Conduire un ensemble de techniques de virologie, biochimie, biologie cellulaire, biologie moléculaire, imagerie à fluorescence et microscopie électronique
Biologie cellulaire :
- Culture cellulaire (manip de transfection, d’infection et d’analyse d’interactome)
Virologie :
- Production et purification de virus L2
Biologie moléculaire:
- Clonage
- Expression de protéine en système bactérien et purification par chromatographie
- Expression de protéine membranaire in vitro en système cell-free en présence de détergent ou couplé à des microsome
- Caractérisation biochimique et biophysique des protéines recombinantes et des interactions protéines-lipides
Imagerie à fluorescence :
- préparation d’échantillons sur cellules fixées ou live
- Acquisition et analyse de données
Microscopie électronique :
- Préparation d’échantillons pour la microscopie électronique en bloc de résine et analyse des données de volume EM
- Préparation d’échantillons par plunge-freezing pour la cryo et analyse des données de cryo microscopie électronique
Activités Transverses
- Gestion et organisation des moyens techniques pour étudier le rôle de protéines dans le remodelage des membranes soit in vitro après reconstitution de protéoliposomes, soit directement in cellula dans un contexte d’infection virale ou non
- Assurer le suivi et la veille technologique des analyses de remodellage cellulaire induit par les virus et la formation d’usines virales membranaires ou liquides en particulier
- Entretien de l’expertise méthodologique au sein du Département de Virologie en microscopie électronique 3D et cryo
Contexte de travail :
L’agent sera rattaché à l’Institut de Biologie Intégrative de la Cellule (I2BC), une unité mixte de recherche CEA, CNRS et Université Paris-Saclay (UMR9198). L’unité est constituée de 59 équipes de recherches réparties dans 5 départements scientifiques, 17 plateformes technologiques et desservices supports et ssoutiens.
L’IE travaillera au sein de l’équipe "Réplication et assemblage des poxvirus" dans le département de Virologie de l’I2BC, qui apporte une nouvelle thématique de recherche, un nouveau modèle biologique (poxvirus) et une expertise technologique. Dans le cadre de l’appel pour la cr
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